Terapia Génica

La terapia génica promete estimular la producción de moduladores de la respuesta inmune en el hospedador, sin necesidad de administrarlos. Y también impedir la expresión de algunos genes o interrumpir procesos vitales del bacilo y hasta introducirle genes suicidas. Queda por demostrar si esto es posible y efectivo.

http://www.medicinabuenosaires.com/revistas/vol60-00/1/latuberculosis.htm

http://www.ciencia101.com/wp-content/uploads/2009/04/port_antibiotico.jpg

Células Madre Autólogas

Una nueva alternativa de tratamiento para el EPOC y enfermedades pulmonares crónicas.

·         Células madre residentes del pulmón

En contraste con los epitelios intestinales y dérmicos, los cuales son altamente proliferativos y de renovación rápida, la respuesta del tejido respiratorio es extremadamente lenta frente al daño. Cada una de la regiones de la tráquea, bronquios, y regiones alveolares dentro del pulmón tiene distintas poblaciones de  células madre y progenitoras residentes, las cuales poseen propiedades fisiológicas únicas.

En Mayo del 2011 el New England Journal of Medicine publicó un excitante e interesante artículo científico del Brigham and Women’s Hospital, de la Escuela de Medicina de la Universidad de Harvard en  Boston (USA) y de la Universidad de Parma, en  Italia; confirmando sólida evidencia acerca del hallazgo y aislamiento de células madre pulmonares. Investigadores de ambas Universidades encontraron que los pulmones humanos contienen células madre indiferenciadas anidadas  en nichos en las vías aéreas distales.

Este es un hallazgo científico es muy importante debido a que confirma el hecho de que existen células madre en el pulmón de los humanos capaces de regenerar los tejidos pulmonares y mejorar las enfermedades como la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), o la fibrosis. El artículo provee varias líneas de evidencia sustentable de la existencia de células madre humanas en los pulmones. Estas células se dividen en forma asimétrica o distinta para generar bronquiolos, alvéolos, y vasos sanguíneos pulmonares con características del humano y de distintos calibres (incluso capilares) en ratones vivos a quienes se les trasplantaron dichas células, lo cual confirma la regeneración de los pulmones dañados.

http://unidadaferesis.wordpress.com/2011/12/24/celulas-madre-autologas-una-nueva-alternativa-de-tratamiento-para-el-epoc-y-enfermedades-pulmonares-cronicas/

http://www.forumclinic.org/epoc/noticias/descubren-clulas-madre-de-pulmn-humano-con-la-capa

http://www.sobrecelulasmadre.com/wp-content/uploads/2009/12/celula-madre.jpg

Células Madre

El descubrimiento fue hecho por investigadores de Estados Unidos. "Esta investigación puso al día por primera vez una verdadera célula madre pulmonar que ofrece potencialmente a los que sufren de enfermedades crónicas del pulmón, una opción de tratamiento totalmente nuevo regenerando o reparando las partes dañadas de este órgano"

Estas células pulmonares son capaces de regenerarse, para luego integrar estructuras biológicas múltiples del pulmón como bronquiolos, alvéolos y vasos del pulmón, precisa el médico.

·         Así sería el tratamiento

El tratamiento para curar enfermedades pulmonares con células madres, consistiría en extraer una muestra de tejido pulmonar de los pacientes, extraer las células madres, multiplicarlas en el laboratorio y volverlas a introducir en los pulmones que ya están dañados para regenerarlos.

Esta cura no causaría rechazo del sistema inmunológico por parte del paciente, debido a que las células habrían sido obtenidas de tejido del mismo paciente.

http://www.eluniversal.com.co/cartagena/vida-sana/celulas-madre-regenerarian-tejidos-de-pulmon-24739

http://www.eluniverso.com/2011/05/11/1/1384/descubren-celulas-madres-claves-regenerar-tejidos-pulmon.html

CONSTRUCCIÓN DE UN VECTOR DE CLONACIÓN MÚLTIPLE PARA EL MEJORAMIENTO GENÉTICO DE Amycolatopsis mediterranei, PRODUCTOR DE RIFAMPICINA

La rifampicina B, es un antibiótico del grupo de las ansamicinas, ampliamente usada para el tratamiento clínico de la tuberculosis, lepra e infecciones micobacterianas relacionadas con el SIDA. Uno de los pasos limitantes para la producción de rifamicina B es la incorporación de oxígeno al intermediario rifampicina W, reacción mediada por el gen rif-orf5, que codifica para un citocromo P450 monooxigenasa.

http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/acapulco09/TRABAJOS/AREA_VI/CVI-52.pdf

Vacunas Recombinantes

BCG Tecnología del ADN recombinante

Se puede  introducir fragmentos de ADN en regiones cromosomales con suma

precisión.

Se puede reemplazar una región por su alelo mutado, mediante recombinación homóloga.

Varias estrategias han venido desarrollándose, con vacunas vivas atenuadas inactivadas (vacunas atenuadas de M. tuberculosis complex, recombinantes, de subunidades proteicas y vacunas de DNA).

En el momento actual las vacunas de BCG recombinante y las vacunas de DNA parecen ser las más prometedoras.

http://www.cenave.gob.mx/tuberculosis/CURSO%20HG/miercoles/BCG%202009%20HGM.pdf

https://encrypted-tbn0.google.com/images?q=tbn:ANd9GcQA4rvy2dSkjpYmmOSJHr3dFzwXcxaCbt47vpT0xi1VnJ5CxHEIog

http://www.quiminet.com/noticias/crea-la-unam-vacuna-recombinante-contra-la-tuberculosis-2105589.htm

ADN Recombinante

·         La tecnología del ADN recombinante permite manipular el ADN, aislando, pegando, reproduciendo y secuenciando distintos fragmentos del mismo. De manera que, con estas técnicas se puede introducir en el ADN de un organismo un fragmento de interés procedente de otro organismo donante.

Por lo tanto, se denominará ADN recombinante a cualquier molécula de ADN formada por la unión de segmentos de ADN de origen diferente.

Para que este procedimiento pueda realizarse, es necesario el uso de unas moléculas denominadas enzimas que se encargan de cortar y pegar el ADN por las regiones adecuadas. Por un lado, las enzimas de restricción (endonucleasas) actúan como tijeras capaces de cortar el ADN por regiones específicas, cada tipo de endonucleasa posee una región de corte determinada. Una vez que el ADN está cortado las ligasas se encargan de unir los distintos fragmentos del mismo.

http://cmc-1bach.wikispaces.com/ADN+recombinante

Mecanismos moleculares de la respuesta inmune en la tuberculosis pulmonar humana

La tuberculosis pulmonar humana es una enfermedad infecciosa causada por M. tuberculosis; el control de la infección requiere el desarrollo de una respuesta inmune protectora. Este tipo de respuesta

inmunológica incluye la participación de los macró-

fagos alveolares, linfocitos T (CD4+,CD8+, NK y γδ) y la producción de citocinas como: IL-2, IFN-γ, IL-12, IL-18 y TNF-α. Asimismo, de quimiocinas como: RANTES, MCP-1, MIP-1α e IL-8 que tienen un papel muy importante en la migración de las diferentes subpoblaciones celulares al sitio de infección para la formación del granuloma.

  

http://www.medigraphic.com/pdfs/iner/in-2005/in054l.pdf

http://www.vigilanciasanitaria.es/es/articulos/images-es/reconocimiento-antigenico.gif

Aspectos Moleculares del Agente Infeccioso

Aspectos moleculares de la resistencia a Pirazinamida en M. tuberculosis.

Deseamos entender el polimorfismo del gen pirazinamidasa de M. tuberculosis, y su correlación con las características "estructura-función" de la enzima que codifica, para establecer los fundamentos moleculares del uso de técnicas del ADN para el diagnostico de resistencia a Pirazinamida.

http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/enfermedades_torax/v48_n2/Pdf/a02.pdf

Mecanismo Genético Molecular del Huesped

Se han hallado, en el cromosoma 1 de ratones, dos genes dominantes asociados a la sensibilidad a Mycobacterium bovis y a M. tuberculosis.

Ninguno de esos genes explica, por sí solo, la proclividad a la infección ni el desarrollo de la enfermedad. La aparición de granulomas con necrosis en animales sensibles a M. tuberculosis sugiere que el tipo de muerte celular observado en fases tempranas de la infección podría hallarse en la base de la resistencia natural.

http://www. investigacionyciencia.es/Archivos/01-10_Rojas.pdf

En el 2010 de la revista Cell, un grupo de científicos de la Universidad de Washington en Seattle, han dado a conocer que las mutaciones genéticas: del gen lta4h que codifica la producción de leucotrienos (compuestos importantes para la respuesta inmunológica inicial contra muchos patógenos, incluido el bacilo de Koch) se asocia a diferentes grados de susceptibilidad a la infección y desarrollo de enfermedad severa por tuberculosis (TB) y lepra. Los estudios, inicialmente desarrollados en un modelo animal usando larvas del pez cebra, infectados con Mycobacterium marinum, han sido extrapolados a la población humana en pacientes con TB y lepra en Vietnam y Nepal, respectivamente.

Los autores concluyen que la presentación de manera heterocigota de este locus que codifica la enzima Leucotrieno A 4 Hidrolasa (LT4H) se asocia significativamente a una protección para las formas severas de TB y lepra.
De confirmarse la posibilidad de poder detectar esta susceptibilidad genética, sería de utilidad su aplicación para el desarrollo de inmunomoduladores como terapia adyuvante y como marcador pronóstico de cuadros de TB y lepra. Además podría estimar a priori el riesgo de desarrollar TB en personas expuestas como trabajdores de salud, pacientes con VIH, personas antes tratadas, entre otras.
En nuestro medio, al igual que en Vietnam, podría evaluarse la distribución de este locus y ver su correlación con la susceptibilidad y pronóstico de la tuberculosis.

http://www.tbperu.org/2010/05/predisposicion-genetica-la-tuberculosis.html

Otros Métodos Moleculares

• Detección de gamma-interferón (IGRA)

En estos últimos años han aparecido nuevas técnicas con el objetivo de mejorar el diagnóstico de la infección tuberculosa latente. Estas técnicas detectan el gamma-interferón producido por las células T previamente estimuladas (sensibilizadas) por antígenos específi cos de M. tuberculosis como el ESAT-6 (Early Secretory Antigen Target-6) y el CFP-10 (Culture Filtrate Protein 10) y el TB7.7. Existen dos test comercializados: el QFT (QuantiFERON TB Gold o QuantiFERON TB Gold in-Tube, laboratorios Cellestis) y el T-SPOT.TB (de laboratorios Oxford Immunotec, Ltd.). El QFT Gold In-Tube incorpora, además de los dos antígenos citados, un tercero, el TB7.7. El QFT estimula la sangre total incubada con los antígenos y determina por ELISA (pg/ml ó UI/ml) la cantidad de interferón. El T-SPOT.TB requiere separar primero las células mononucleares, estimularlas con los antígenos y hacer la lectura por medio de la técnica del ELISPOT en la cual cada punto representa una célula T secretora de gamma-interferón.

También se han ensayado métodos inmunológicos basados en la detección de anticuerpos, antígenos e inmunocomplejos. Se trata de métodos diagnósticos indirectos. Los más evaluados tienen como objetivo la detección de la respuesta humoral (IgG, IgA, IgM) a las micobacterias a través del ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (Enzyme- Linked Immuno-Sorbent Assay, ELISA).
http://www.sag.gob.cl/OpenNet_Editor/recursos/labo.jpg